細胞増殖の評価はなぜ重要なのか？
細胞培養では、細胞の増殖速度や培養状態を把握することが重要です。
例えば、薬剤評価では、処理した細胞の増殖がどの程度抑制されたかを調べます。
また、培地や培養添加剤の開発では、異なる条件による細胞増殖の違いを比較します。
従来の細胞数測定では、細胞を回収して計数する方法が一般的ですが、繰り返し測定する場合には手間がかかります。
コンフルエンシーとは？
コンフルエンシーとは、培養容器の観察領域において、細胞が占める面積の割合を示す指標です。
例えば、コンフルエンシー50％は、観察領域のおよそ半分を細胞が覆っている状態を意味します。
コンフルエンシーを経時的に測定することで、細胞増殖や培養状態の変化を把握できます。
ただし、コンフルエンシーは細胞数そのものではなく、細胞の大きさや形態にも影響される指標です。
CYTONOTEによる自動観察
フランスIPRASENSE社のCYTONOTEは、レンズレスイメージング技術を使用したライブセルイメージングシステムです。
CO₂インキュベーター内で細胞を継続的に撮影し、培養中の変化を記録できます。
レンズレス方式のため、通常の顕微鏡で必要となるフォーカス調整を行わずに観察できることが特徴です。
HORUSソフトウェアによる定量解析
CYTONOTE専用のHORUSソフトウェアでは、取得画像から細胞数やコンフルエンシーなどを解析できます。
測定結果を時間軸に沿って表示することで、細胞増殖曲線を作成できます。
これにより、異なる培養条件における細胞増殖の違いを比較できます。
メーカー公開の細胞増殖試験
IPRASENSE社は、CYTONOTE 6Wを使用したVERO細胞の増殖試験を公開しています。
この試験では、6ウェルプレートを使用し、3種類の血清条件をそれぞれ2反復で比較しています。
4日間にわたって細胞を継続観察し、HORUSソフトウェアで増殖曲線を取得しています。
このように、CYTONOTEは培地や血清条件の比較にも利用できます。
想定される研究用途
・細胞増殖試験
・培地・血清条件の最適化
・薬剤による増殖抑制の評価
・細胞播種密度の検討
・培養条件の比較
・細胞培養の品質管理
まとめ
細胞増殖の評価では、単一時点の細胞数だけでなく、時間経過に伴う変化を把握することが重要です。
CYTONOTEとHORUSを組み合わせることで、細胞を継続的に観察し、コンフルエンシーや増殖曲線を取得できます。
細胞増殖試験や培養条件の最適化にCYTONOTEの導入をご検討の際は、株式会社インミディアムまでお問い合わせください。
製造元：IPRASENSE（フランス）
日本国内取扱い：株式会社インミディアム
https://www.inmediam.com
※本製品は研究用です。診断目的には使用できません。