動脈硬化病変は多様な細胞で構成される
動脈硬化は、血管壁に脂質や炎症細胞などが蓄積し、血管の構造や機能が変化する病態です。
動脈硬化病変には、血管平滑筋細胞、内皮細胞、マクロファージなど、さまざまな細胞が存在しています。
これらの細胞は、病変の形成や進展に異なる役割を果たしています。
特にマクロファージは、脂質の取り込みや炎症反応などに関与する重要な細胞です。
しかし、病変全体を用いた遺伝子発現解析では、複数の細胞に由来する情報が混在してしまいます。
LCMで目的の細胞集団を選択する
レーザーマイクロダイセクション（LCM）は、組織切片を顕微鏡で観察しながら、目的の細胞や領域を選択的に回収する技術です。
動脈硬化研究では、病変内のマクロファージが存在する領域を選択して回収し、遺伝子発現などを解析する方法が考えられます。
これにより、病変全体の解析では見えにくい、特定の細胞集団に関連した分子変化を調べることができます。
マクロファージの同定が重要
目的細胞を正確に回収するためには、組織内でマクロファージを同定することが重要です。
組織形態だけでなく、必要に応じて免疫染色などの方法を組み合わせます。
ただし、染色方法によってはRNAやタンパク質の品質に影響する場合があるため、下流解析を考慮した試料調製が必要です。
Accuva Cellectによる細胞回収
米国LAXCO社のAccuva Cellectは、IRレーザーとUVレーザーを搭載したLCMシステムです。
IRレーザーは少数細胞の選択的な回収に、UVレーザーは組織領域の精密な切断に利用できます。
血管病変のように異なる細胞が密接して存在する組織では、回収する領域を適切に指定することが重要です。
回収後の遺伝子発現解析
回収した細胞や組織領域からRNAを抽出し、RT-qPCRや遺伝子発現解析を行うことで、病変内の分子変化を調べることができます。
例えば、炎症関連遺伝子や脂質代謝関連遺伝子の発現を比較する研究が考えられます。
ただし、回収試料に他の細胞が混入する可能性があるため、細胞集団の純度や回収量を確認することが重要です。
まとめ
動脈硬化研究では、病変全体の解析に加え、特定の細胞集団に注目した分子解析が役立ちます。
LCMは、組織内の位置情報を参考にしながら、目的細胞を選択的に回収するための技術です。
Accuva Cellectは、IR・UVデュアルレーザーによって、こうした研究を支援します。
動脈硬化研究や血管病変の細胞回収については、株式会社インミディアムまでお問い合わせください。
製造元：LAXCO（米国）
日本国内取扱い：株式会社インミディアム
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